在獲得想要的DNA片段之后,使用合適的載體可以對(duì)這些片段進(jìn)行操扌作,實(shí)現(xiàn)想做的研究。目前,本公司有很多載體供大家進(jìn)行各類實(shí)驗(yàn),一般情況下,大家只需要選擇并找到合適的載體就可以了。少數(shù)情況下,可能會(huì)涉及到需要對(duì)載體進(jìn)行改造。
方法
通過(guò)酶切將DNA片段連入載體
實(shí)驗(yàn)原理
DNA連接酶可以催化相鄰DNA鏈的5‘磷酸基團(tuán)與3‘羥基形成磷酸二酯鍵,.淳風(fēng)生物科技|||蘭州載體構(gòu)建公司
,從而完成連接。常見(jiàn)的依賴限制性內(nèi)切酶的連接,是將載體和目標(biāo)DNA片段(外源片段)進(jìn)行相同方式的酶,產(chǎn)生可以互補(bǔ)配對(duì)的粘性末端,然后進(jìn)行連接。根據(jù)使用的酶數(shù)量,西安淳風(fēng)生物科技有限公司,淳風(fēng)生物科技,可以分成雙酶切、單酶切兩種類型。單酶切(或者產(chǎn)生兩個(gè)平末端的雙酶切)由于載體產(chǎn)生的粘性末端可以發(fā)生自連,需要使用去磷酸化酶處理載體,消除其5‘磷酸基團(tuán)防止自身連接。而雙酶切一般不會(huì)產(chǎn)生可以自連的粘性末端,不需考慮這一問(wèn)題。
服務(wù)周期
10個(gè)工作日
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,一般情況下,大家只需要選擇并找到合適的載體就可以了。少數(shù)情況下,可能會(huì)涉及到需要對(duì)載體進(jìn)行改造。
方法
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實(shí)驗(yàn)原理
DNA連接酶可以催化相鄰DNA鏈的5‘磷酸基團(tuán)與3‘羥基形成磷酸二酯鍵,從而完成連接。常見(jiàn)的依賴限制性內(nèi)切酶的連接,是將載體和目標(biāo)DNA片段(外源片段)進(jìn)行相同方式的酶,產(chǎn)生可以互補(bǔ)配對(duì)的粘性末端,然后進(jìn)行連接。根據(jù)使用的酶數(shù)量,可以分成雙酶切、單酶切兩種類型。單酶切(或者產(chǎn)生兩個(gè)平末端的雙酶切)由于載體產(chǎn)生的粘性末端可以發(fā)生自連,需要使用去磷酸化酶處理載體,消除其5‘磷酸基團(tuán)防止自身連接。而雙酶切一般不會(huì)產(chǎn)生可以自連的粘性末端,不需考慮這一問(wèn)題。
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DNA連接酶可以催化相鄰DNA鏈的5‘磷酸基團(tuán)與3‘羥基形成磷酸二酯鍵,從而完成連接。常見(jiàn)的依賴限制性內(nèi)切酶的連接,是將載體和目標(biāo)DNA片段(外源片段)進(jìn)行相同方式的酶,產(chǎn)生可以互補(bǔ)配對(duì)的粘性末端,然后進(jìn)行連接。根據(jù)使用的酶數(shù)量,可以分成雙酶切、單酶切兩種類型。單酶切(或者產(chǎn)生兩個(gè)平末端的雙酶切)由于載體產(chǎn)生的粘性末端可以發(fā)生纟自連,需要使用去磷酸化酶處理載體,消除其5‘磷酸基團(tuán)防止自身連接。而雙酶切一般不會(huì)產(chǎn)生可以自連的粘性末端,不需考慮這一問(wèn)題。
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10個(gè)工作日
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