許昌市眾誠(chéng)絕緣材料有限公司

實(shí)驗(yàn)原理及目的
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation，ChIP)是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用最為主要的方法之一。本實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下通過(guò)化學(xué)交聯(lián)劑將蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物固定，并將其隨機(jī)打斷成一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)的方法沉淀出目的蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合體，從而特異性地富集與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段。通過(guò)對(duì)目的DNA片斷的純化與檢測(cè)，南寧染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)服務(wù)
，最終獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)廣泛的應(yīng)用于表觀遺傳（組蛋白等）分析，轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析等蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的試驗(yàn)分析中。隨著第二代測(cè)序技術(shù)的逐步完善和成閂熟，西安淳風(fēng)生物科技有限公司，淳風(fēng)生物科技，染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合第二代高通量測(cè)序技術(shù)（ChIP-seq）正逐步成為基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究中一種非常有效的研究手段。
 
實(shí)驗(yàn)步驟
A］實(shí)驗(yàn)材料的交聯(lián)處理（室溫）：
B］實(shí)驗(yàn)材料的染色質(zhì)抽提（4度）：
C］染色質(zhì)的超聲波片段化（4度）：
D］染色質(zhì)前處理和免疫共沉淀（4度）：
孵育抗體和磁珠
染色質(zhì)的預(yù)處理
免疫沉淀
E］洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物并釋放DNA（4度）：
F］純化DNA（室溫）：
G］對(duì)ChIPDNA進(jìn)行定量：
 
結(jié)果分析：
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%；
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務(wù)周期
20個(gè)工作日

材料條件
實(shí)驗(yàn)材料：ChIP級(jí)抗體，5ug/樣本；
細(xì)胞：大于107；
動(dòng)物組織：大于0.1g/樣本；
植物組織：5g/樣本。
 
交付結(jié)果
實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)分析結(jié)果）；
實(shí)驗(yàn)原理及目的
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation，ChIP)是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用最為主要的方法之一。本實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下通過(guò)化學(xué)交聯(lián)劑將蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物固勹定，并將其隨機(jī)打斷成一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)的方法沉淀出目的蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合體，從而特異性地富集與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段。通過(guò)對(duì)目的DNA片斷的純化與檢測(cè)，最終獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)廣泛的應(yīng)用于表觀遺傳（組蛋白等）分析，轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析等蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的試驗(yàn)分析中。隨著第二代測(cè)序技術(shù)的逐步完善和成熟，染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合第二代高通量測(cè)序技術(shù)（ChIP-seq）正逐步成為基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究中一種非常有效的研究手段。
 
實(shí)驗(yàn)步驟
A］實(shí)驗(yàn)材料的交聯(lián)處理（室溫）：
B］實(shí)驗(yàn)材料的染色質(zhì)抽提（4度）：
C］染色質(zhì)的超聲波片段化（4度）：
D］染色質(zhì)前處理和免疫共沉淀（4度）：
孵育抗體和磁珠
染色質(zhì)的預(yù)處理
免疫沉淀
E］洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物并釋放DNA（4度）：
F］純化DNA（室溫）：
G］對(duì)ChIPDNA進(jìn)行定量：
 
結(jié)果分析：
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%；
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務(wù)周期
20個(gè)工作日

材料條件
實(shí)驗(yàn)材料：ChIP級(jí)抗體，南寧染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)服務(wù)
，5ug/樣本；
細(xì)胞：大于107；
動(dòng)物組織：大于0.1g/樣本；
植物組織：5g/樣本。
 
交付結(jié)果
實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)分析結(jié)果）；
實(shí)驗(yàn)原理及目的
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation，ChIP)是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用最為主要的方法之一。本實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下通過(guò)化學(xué)交聯(lián)劑將蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物固定，并將其隨機(jī)打斷成一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)的方法沉淀出目的蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合體，從而特異性地富集與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段。通過(guò)對(duì)目的DNA片斷的純化與檢測(cè)，最終獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)廣泛的應(yīng)用于表觀遺傳（組蛋白等）分析，轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析等蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的試驗(yàn)分析中。隨著第二代測(cè)序技術(shù)的逐步完善和成熟，染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合第二代高通量測(cè)序技術(shù)（ChIP-seq）正逐步成為基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究中一種非常有效的研究手段。
 
實(shí)驗(yàn)步驟
A］實(shí)驗(yàn)材料的交聯(lián)處理（室溫）：
B］實(shí)驗(yàn)材料的染色質(zhì)抽提（4度）：
C］染色質(zhì)的超聲波片段化（4度）：
D］染色質(zhì)前處理和免疫共沉淀（4度）：
孵育抗體和磁珠
染色質(zhì)的預(yù)處理
免疫沉淀
E］洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物并釋放DNA（4度）：
F］純化DNA（室溫）：
G］對(duì)ChIPDNA進(jìn)行定量：
 
結(jié)果分析：
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%；
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務(wù)周期
20個(gè)工作日

材料條件
實(shí)驗(yàn)材料：ChIP級(jí)抗體，5ug/樣本；
細(xì)胞：大于107；
動(dòng)物組織：大于0.1g/樣本；
植物組織：5g/樣本。
 
交付結(jié)果
實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)分析結(jié)果）；

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