蘇州艾瑞德生物科技有限公司

【原理】 
       禽流感是由禽流感病毒(Avian influenza virus ,AIV)引起的一種禽類急性高度致病性傳染病。本病以急性敗血性死亡到無(wú)癥狀帶毒等多種病癥為特點(diǎn)，禽類感染后體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生特異性抗體。檢測(cè)特異性禽流感病毒抗體可作為該病疫苗免疫狀況及該病輔助檢測(cè)指標(biāo)。
       本試劑盒采用ELISA方法檢測(cè)雞血清中的特異性抗禽流感病毒抗體。本試劑靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。
【試劑組成】
1.預(yù)包被板 48T/96T;   7. 終止液(6號(hào)液) 1支; 
2.酶結(jié)合物(1號(hào)液) 1支;   8. 陽(yáng)性對(duì)照品 1支; 
3.濃縮洗滌液(2號(hào)液) 1支;   9. 陰性對(duì)照品 1支; 
4.底物(3號(hào)液) 1支;   10.不干膠膜 1/2片; 
5.顯色劑(4號(hào)液) 1支;   11.自封袋 1個(gè); 
6.樣本稀釋液(5號(hào)液) 1支;   12.使用說(shuō)明書(shū) 1份; 


【操作程序】
1．洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液（2號(hào)液）按1：10稀釋，如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。
2．樣本稀釋   用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清樣本按1：100稀釋，如取5ul樣本與495ul樣本稀釋液，混勻。陰性、陽(yáng)性對(duì)照品不用稀釋，直接加樣。
3．加樣反應(yīng)   每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔(分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測(cè)孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿工作洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘后再甩凈，拍干。
4．加酶反應(yīng)   除空白對(duì)照孔外，每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液) 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
5．顯色反應(yīng)   加底物液(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴，混勻，37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)1滴，終止反應(yīng)（加終止液后，藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
     陰性對(duì)照呈無(wú)色或淺黃色，陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。
     以空白對(duì)照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長(zhǎng)）讀取吸光度（A值）。待檢孔A值大于陰性對(duì)照A值平均值的2.1倍者判為陽(yáng)性。如陰性對(duì)照A值的平均值低于0.08時(shí)按0.08計(jì)算。
【注意事項(xiàng)】
1.試劑盒于2-8℃保存，有效期6個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時(shí)，建議使用水浴箱。如無(wú)條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。