葉綠素儀是一款專用測(cè)定植物葉綠素含量的檢測(cè)儀器,該款儀器在各領(lǐng)域中均有廣泛的運(yùn)用。葉綠素含量是反映植物特別是光合機(jī)構(gòu)生理狀況的一個(gè)基本指標(biāo),植物生理研究中經(jīng)常涉及葉綠素含量的測(cè)定。但如何測(cè)定葉綠素含量,迄今尚未見到一篇簡便方法的介紹。不少研究論文和實(shí)驗(yàn)教材(中國科學(xué)院上海植物生理研究所和上海市植物生理學(xué)會(huì);侯福林;藤利榮和孟慶繁;李玲中提到或介紹的測(cè)定方法一般都包括葉片稱重、研磨、沖洗、過濾和定容(25mL或更多)及稀釋等繁瑣步驟,既費(fèi)時(shí)間,又費(fèi)溶劑,不適于科學(xué)研究中大批量樣品的測(cè)定,特別是以葉片鮮重表示的葉綠素含量,不僅容易受葉片含水量變化的干擾,給測(cè)定結(jié)果帶來偏差,而且也不便于同以單位葉面積表示的光合速率聯(lián)系起來分析兩者的關(guān)系
使用葉綠素含量測(cè)定儀不少實(shí)驗(yàn)教材中介紹的研磨過濾方法提取葉綠素,不僅費(fèi)時(shí)間,從稱重到定容結(jié)束,1個(gè)樣品至少需要10min,而且由于不可避免的損失,所得到的結(jié)果一般會(huì)低一些;而用本文中的葉絲浸提法,不算浸提的等待時(shí)間,從取樣、切細(xì)到投入80%丙酮浸提的操作時(shí)間一般不超過1 ̄2min,而且可以避免過濾造成的損失(圖1)。從用兩種方法測(cè)定的結(jié)果可以看到,用葉絲浸提法得到的葉綠素提取液可以直接用于比色測(cè)定光密度,不需要過濾或離心(圖2)。雖然在用葉片細(xì)絲的浸提液中含有少浸出物的雜質(zhì),但由于其對(duì)比色波長的光沒有明顯的吸收,所以測(cè)定的結(jié)果受到的影響并不明顯。眾所周知,由于自然條件下光強(qiáng)、氣溫和土壤水分狀況及葉片蒸騰作用的變化,葉片的含水量在一天內(nèi)的不同時(shí)刻會(huì)明顯不同,特別是在遭遇干旱或水分脅迫處理時(shí),處理和對(duì)照葉片的含水量會(huì)明顯不同。在這種情況下,以單位葉片鮮重表示葉綠素含量會(huì)造成導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)論的假象。圖3結(jié)果清楚地說明了這個(gè)問題:雖然以單位葉面積表示的葉綠素含量是一樣的,可是在以單位葉片鮮重表示時(shí),那些含水量高的葉片葉綠素含量明顯降低。
葉綠素儀:http://www.ny-17.com/
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