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[供應(yīng)]親和純化/質(zhì)譜Affinity purification，AP/MS
- 產(chǎn)品產(chǎn)地：廣州
- 產(chǎn)品品牌：輝駿生物
- 包裝規(guī)格：B007
- 產(chǎn)品數(shù)量：999
- 計(jì)量單位：個(gè)
- 產(chǎn)品單價(jià)：1
- 更新日期：2024-03-21 10:30:56
- 有效期至：2034-03-19
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親和純化/質(zhì)譜Affinity purification，AP/MS
詳細(xì)信息
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AP/MS服務(wù)簡介：
與常規(guī)Co-IP實(shí)驗(yàn)類似，只是親和純化法可不用引入抗體。將標(biāo)簽（如SBP）與特定基因融合表達(dá)，融合蛋白用鏈霉親和素（strep）磁珠親和純化，經(jīng)生物素洗脫，即可得到蛋白復(fù)合物。將實(shí)驗(yàn)組和對照組的洗脫蛋白分別做質(zhì)譜，在實(shí)驗(yàn)組結(jié)果中扣除對照組中的蛋白，即可鑒定出與靶蛋白互作的蛋白。
AP/MS技術(shù)優(yōu)勢：
1、得到的互作蛋白是細(xì)胞內(nèi)與誘餌蛋白天然互作的，符合體內(nèi)真實(shí)生理情況，可信度高；
2、不用抗體“拉取”互作蛋白復(fù)合物，避免了抗體的污染；
3、所得洗脫液可直接酶解，進(jìn)行質(zhì)譜，減少了跑膠引起的蛋白損失。
服務(wù)內(nèi)容:
1、構(gòu)建含SBP標(biāo)簽的靶基因表達(dá)載體質(zhì)粒；
2、目的細(xì)胞中過表達(dá)帶標(biāo)簽的誘餌蛋白，細(xì)胞裂解液做WB檢測表達(dá)效果；
3、用strep微珠進(jìn)行蛋白復(fù)合物的純化和洗脫；
4、實(shí)驗(yàn)組和對照組的洗脫液分別用胰酶酶解；
5、LC-MS/MS，獲得蛋白質(zhì)的定性信息；
6、結(jié)果分析與報(bào)告整理。
技術(shù)流程圖：
服務(wù)項(xiàng)目客戶提供結(jié)果交付實(shí)驗(yàn)周期AP/MS1、誘餌基因的名稱、序列、物種等相關(guān)信息或誘餌基因的cDNA模板等
2、待研究的細(xì)胞（保證細(xì)胞狀態(tài)良好，易于用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染）及其培養(yǎng)相關(guān)信息1、構(gòu)建好的真核表達(dá)載體
2、實(shí)驗(yàn)組和對照組蛋白的質(zhì)譜鑒定結(jié)果
3、數(shù)據(jù)分析結(jié)果預(yù)計(jì)2-2.5個(gè)月
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