一、技術(shù)簡介
    miRNA抑制載體導(dǎo)入細(xì)胞后可以表達(dá)產(chǎn)生特異性抑制靶miRNA的小分子片段。該片段與靶miRNA互補(bǔ)形成穩(wěn)定的復(fù)合物,從而阻止了miRNA對靶mRNA的降解或者翻譯抑制,上調(diào)了miRNA靶基因的表達(dá)。
    采用載體方法抑制內(nèi)源性miRNA的方法主要有2種,一是shRNA抑制法,采用U6或H1等POLIII啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)抑制miRNA的shRNA片段,二是采用串聯(lián)的多個(gè)miRNA互補(bǔ)序列形成吸附“海綿”,從而高效的抑制miRNA。
圖 miRNA抑制慢病毒載體構(gòu)建
二、技術(shù)優(yōu)勢
    1、 用途廣泛,既可被包裝產(chǎn)生miRNA抑制慢病毒,又可以質(zhì)粒形式直接轉(zhuǎn)染細(xì)胞而發(fā)揮對miRNA的抑制作用
    2、 ShRNA抑制法可以直接合成抑制miRNA的片段,設(shè)計(jì)和構(gòu)建簡單、方便;
    3、 海綿體法可以更高效的抑制靶miRNA,并且可以實(shí)現(xiàn)組織特異性抑制。
三、服務(wù)內(nèi)容
   1、 合成針對靶miRNA的shRNA或設(shè)計(jì)好的海綿體序列
   2、 目的序列與慢病毒載體的連接;
   3、 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
   4、 測序驗(yàn)證;
   5、 實(shí)驗(yàn)報(bào)告和原始結(jié)果提交。
四、服務(wù)須知
 服務(wù)項(xiàng)目客戶提供交付產(chǎn)物實(shí)驗(yàn)周期miRNA抑制慢病毒載體構(gòu)建(shRNA法)要抑制的miRNA序列1、miRNA抑制慢病毒載體
2、載體圖譜、測序結(jié)果2-3周miRNA抑制慢病毒載體構(gòu)建(海綿體法)設(shè)計(jì)好的海綿體或要抑制的miRNA序列1、miRNA抑制慢病毒載體
2、載體圖譜、測序結(jié)果3-4周
五、實(shí)驗(yàn)周期及實(shí)驗(yàn)費(fèi)用:詳情請咨詢我司客服人員
 
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